Nama Galeri Palatine berasal dari keberadaannya di istana yang merupakan markas besar keluarga Medici, terletak di lantai bangsawan dan terbagi menjadi 28 ruangan. Galeri ini dibuka pada tahun 1828. Ciri terpenting yang membedakan Palatine Galeri adalah pembagian dan penataan lukisan yang tidak mengikuti urutan kronologis seperti yang lazim terjadi di galeri dan museum lain, melainkan disusun menurut dekorasi. Karya-karya yang ditampilkan dalam pameran berkisar dari abad keenam belas hingga ketujuh belas, dan koleksi terpenting yang dipamerkan adalah karya seniman Raphael dan Titian serta banyak karya seniman paling terkenal pada masa itu.